關(guān)節(jié)炎模型誘導(dǎo)用膠原（Collagen）產(chǎn)品專題
（Collagen Induced Arthritis(CIA)膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎）
文章關(guān)鍵詞：
Arthritis 關(guān)節(jié)炎；Incomplete Freund's Adjuvant (IFA) 弗氏不*佐劑；Complete Freund's Adjuvant (CFA) 弗氏*佐劑；Type II Collagen II型膠原；Chondrex Inc.;
背景描述：
【膠原Collagen】Chondrex Inc.提供各種物種和類型的高度純化的II型膠原、IX型和XI型軟骨膠原，用于建立CIA（膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎）模型。CIA可通過II型膠原在嚙齒類動物和非人靈長類動物中誘導(dǎo)而成，但有文獻報道，XI型膠原也能誘導(dǎo)小鼠和大鼠的關(guān)節(jié)炎模型，因為XI型膠原的α3（XI）鏈與II型膠原的α1（II）鏈一致。另外，IX型膠原的自發(fā)性抗體也有助于小鼠多軟骨炎發(fā)病。科研人員需根據(jù)自身實驗?zāi)康倪x擇合適的膠原物種和類型。
【佐劑Adjuvant】膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎（CIA）能在某些小鼠、大鼠和非人哺乳動物品系中成功誘導(dǎo)，通過將II型膠原與佐劑混合免疫的方法。為了成功誘導(dǎo)動物CIA，用來乳化膠原的佐劑類型至關(guān)重要。Chondrex Inc.提供不*佐劑和含各種濃度滅活結(jié)核分枝桿菌的*佐劑從而能用于優(yōu)化CIA免疫條件。
成功建模需考慮的幾大重要因素：
一、供體動物（Animal Vendors）
二、飼養(yǎng)條件（Housing Conditions）
三、動物年齡和品系（Animal Age&Strains）
A）小鼠（Mouse）
【年齡Age】：選擇至少7-8周齡，具成熟免疫系統(tǒng)的小鼠。老化的小鼠可能呈低發(fā)病率和低惡化程度。
【品系Strains】：膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎（CIA）模型的敏感程度與MHC-class II分子有關(guān)，其對免疫用II型膠原產(chǎn)生反應(yīng)。詳見【表1.建立CIA模型的常用大鼠和小鼠品種】。
DBA/1 (H-2q)和B10.RIII (H-2r)小鼠對CIA敏感型很高，DBA/1小鼠對雞，牛和豬來源的II型膠原有反應(yīng)，B10.RIII對牛和豬來源的II型膠原有反應(yīng)，但是對雞II型膠原反應(yīng)很弱。
DBA/1 (H-2q)和B10.RIII (H-2r)小鼠對小鼠II型膠原反應(yīng)很弱。即使用大量的小鼠II型膠原來免疫，CIA發(fā)病率仍非常低，約10%。
另外，一些CIA耐性小鼠品種能夠用來產(chǎn)生致關(guān)節(jié)炎抗體，說明CIA不僅是受限制于MHC類型。比如，IFN-γ或IL-10敲除的CIA抗性品種C57BL/6，129/Sv (H-2b)和Balb/c (H-2d)小鼠能夠產(chǎn)生致關(guān)節(jié)炎自抗體和關(guān)節(jié)炎，這表明關(guān)節(jié)炎的敏感性也受細胞因子的高度調(diào)控。
B）大鼠（Rat）
【年齡Age】：選擇至少7-8周齡，具成熟免疫系統(tǒng)的大鼠。
【品系Strains】：高敏感大鼠品系（Sprague-Dawley (SD)(RT1f), Wistar (RT1u)(1), BioBreeding/Diabetes-resistant (BB/DR)(RT1u) (9), Wistar Furth (RT1u), Louvain (LOU) (RT1u), Osborne-Mendal (OM) (RT1u), and Lewis (LEW) (RT1l) rats）；
BB大鼠是用來建立CIA的品種。Dark Agouti (DA)大鼠對CIA高度敏感，但對油誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎模型（礦物油：IFA，單獨）低敏感。因此，DA大鼠的CIA模型可能同時表現(xiàn)出兩種不同病理機制。因此，DA大鼠不建議用來建立CIA模型。
表1. 建立CIA模型的常用大小鼠品種（Mouse and Rat strains commonly used for CIA） | |||||
Mouse Strain | H-2 Type | CIA Susceptibility | Rat Strain | MHC RT1 haplotype | CIA Susceptibility |
DBA/1 | q | High | Sprague-Dawley (SD) | f | High |
B10.Q | q | High | Wistar | u | High |
B10.G | q | High | Lewis（Lew） | I | High |
NFR/N | q | High | BioBreeding (BB)/Diabetes- resistant (DR) | u | High |
SWR | q | Resistant | Wistar Furth | u | High |
B10.RIII | r | High | Louvain | u | High |
B10 | b | Low | Osborne-Mendal (OM) | u | High |
C57BL/6 | b | Low | Dark Agouti (DA) | av1 | High |
C57BL/6 beige | b | Resistant |
|
|
|
C57BL/6 x 129/Sv | b | Low |
|
|
|
129/Sv | b | Resistant |
|
|
|
B10.D2/nSn | d | Resistant |
|
|
|
B10.D2/oSn | d | Resistant |
|
|
|
Balb/c nu/nu | d | Resistant |
|
|
|
C3H/He | k | Low |
|
|
|
B10.S | s | Resistant |
|
|
|
SJL/1 | s | Moderate |
|
|
|
C.B-17 scid/scid |
| Resistant |
|
|
|
四、佐劑（Adjuvant）
A）小鼠（Mouse）
弗氏*佐劑（CFA）包含高質(zhì)量的結(jié)核分枝桿菌，對誘導(dǎo)嚴(yán)重的小鼠關(guān)節(jié)炎是必要的，因其能誘導(dǎo)強烈的免疫反應(yīng)。不同于大鼠，將II型膠原和不*佐劑（IFA）乳化在一起不會產(chǎn)生關(guān)節(jié)炎。
強烈的抗體反應(yīng)和正確的抗體亞型對誘導(dǎo)小鼠關(guān)節(jié)炎很重要?？贵w產(chǎn)生取決于抗膠原IgG2a和IgG2b亞型水平，它們能活化補體，誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎的必要步驟。研究顯示，含5mg/ml結(jié)核分枝桿菌的CFA能成功誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎，呈高致病率（50-70%），即使是CIA耐性小鼠品種，比如C57BL/6，B10，129/Sv小鼠（H-2b）。
B）大鼠（Rat）
因大鼠通常對佐劑誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎（AIA）很敏感，不*氟氏佐劑（IFA）可用于建模。
五、膠原（Collagen）
使用高純度的天然II型膠原。去糖基化和變性的膠原都會影響致關(guān)節(jié)炎性，微弱污染比如胃蛋白酶在T細胞刺激反應(yīng)中可能會引起假陽性反應(yīng)。
膠原產(chǎn)品訂購：美國Chondrex原裝，基本現(xiàn)貨提供，咨詢價格和貨期，及技術(shù)問題。
品牌 | 名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
Chondrex | Immunization Grade Bovine Type II Collagen 牛II型膠原 | 20021 | 10 mg, lyophilized |
Chondrex | Immunization Grade Bovine Type II Collagen 牛II型膠原 | 20022 | 2 mg/ml x 5 ml |
Chondrex | Immunization Grade Chick Type II Collagen 雞II型膠原 | 20011 | 10 mg, lyophilized |
Chondrex | Immunization Grade Chick Type II Collagen 雞II型膠原 | 20022 | 2 mg/ml x 5 ml |
Chondrex | Immunization Grade Porcine Type II Collagen 豬II型膠原 | 20031 | 10 mg, lyophilized |
Chondrex | Immunization Grade Porcine Type II Collagen 豬II型膠原 | 20032 | 2 mg/ml x 5 ml |
Chondrex | Immunization Grade Bovine Type IX Collagen 牛IX型膠原 | 1072 | 5 mg, lyophilized |
Chondrex | Immunization Grade Chick Type IX Collagen 雞IX型膠原 | 1071 | 5 mg, lyophilized |
Chondrex | Immunization Grade Porcine Type IX Collagen 豬IX型膠原 | 1073 | 5 mg, lyophilized |
Chondrex | Immunization Grade Bovine Type XI Collagen 牛XI型膠原 | 1082 | 5 mg, lyophilized |
Chondrex | Immunization Grade Chick Type XI Collagen 雞XI型膠原 | 1081 | 5 mg, lyophilized |
Chondrex | Immunization Grade Porcine Type XI Collagen 豬XI型膠原 | 1083 | 5 mg, lyophilized |
操作流程詳見說明書：
Mouse Collagen-Induced Arthritis Protocol
Rat Collagen-Induced Arthritis Protocol
佐劑產(chǎn)品訂購：美國Chondrex原裝，基本現(xiàn)貨提供，咨詢價格和貨期，及技術(shù)問題。
品牌 | 名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
Chondrex | Complete Freund's Adjuvant（CFA），1mg/ml 弗氏*佐劑 | 7008 | 5ml |
Chondrex | Complete Freund's Adjuvant（CFA），2mg/ml 弗氏*佐劑 | 7009 | 5ml |
Chondrex | Complete Freund's Adjuvant（CFA），3mg/ml 弗氏*佐劑 | 7015 | 5ml |
Chondrex | Complete Freund's Adjuvant（CFA），4mg/ml 弗氏*佐劑 | 7001 | 5ml |
Chondrex | Complete Freund's Adjuvant（CFA），5mg/ml 弗氏*佐劑 | 7023 | 5ml |
Chondrex | Incomplete Freund's Adjuvant（IFA）弗氏不*佐劑 | 7002 | 5ml |
— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務(wù)工作，主要從事細胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信”的經(jīng)營理念。堅持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供產(chǎn)品。